漆酶活性檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Laccase activity test kit
關(guān)鍵詞：漆酶活性|漆酶活性檢測(cè)|漆酶活性測(cè)定
漆酶活性檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào)：BC1630
規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×2 瓶，4℃避光保存。

產(chǎn)品說明：
漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，漆酶存在菇、菌及植物中，是一種環(huán)保型酶，其*的催化性質(zhì)在生物檢測(cè)中有廣泛的應(yīng)用。漆酶分解底物 ABTS 產(chǎn)生 ABTS 自由基，在 420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物 ABTS，測(cè)定 ABTS 自由基的增加速率，可計(jì)算得漆酶活性。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、1mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、天平、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水，水浴鍋。

操作步驟：
一、粗酶液提取：
（1）組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
（2）細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；然后4℃，10000g 離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。
（3）培養(yǎng)液：直接檢測(cè)。

相關(guān)文獻(xiàn)：
《Transcriptional analysis of the laccase-like gene from Burkholderia cepacia BNS and expression in Escherichia coli.》 作者:Yinghui Ma,Lijun Li,Haixia Tian,Meihuan Lu,Mallavarapu Megharaj,Wenxiang He 期刊:Appl. Microbiol. Biotechnol. 影響因子:3.67 PMID:30362077